PI染色液使用說明

貨號：FXC0670

規(guī)格：50ml

PI染色液產(chǎn)品簡介

碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)即2,7-二氨基-9-苯基10-二乙胺基丙基碘化菲啶，是一種核酸熒光染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但能夠透過死細(xì)胞和凋亡中晚期細(xì)胞的細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。因此，作為熒光探針常用于細(xì)胞凋亡(apoptosis)或細(xì)胞壞死(necrosis)的檢測。在流式細(xì)胞和激光共聚焦分析中，常用于凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞的區(qū)分以及在免疫染色時用于死細(xì)胞的非特異性染色的減除。由于PI可以定量插入DNA中，因此，還可用于細(xì)胞周期的分析與測定研究。

PI-DNA復(fù)合物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為535 nm和615 nm。

本染色液將濃縮的染液與稀釋液分開放置，一方便為了染液的穩(wěn)定性，另一方便為了快速解凍（稀釋液放2-8℃）

本染色液整體有效期一年，稀釋液長久不用可放-20度。

PI染色液使用說明：

染色液的配制：將PI濃縮液取出解凍，輕輕混勻，短時間離心，根據(jù)使用量，按照1ml PI稀釋液加入20ul PI濃縮液的比例配制，即成。此配好的染色液濃度度為10ug/ml,如果感覺染色顏色比較深，可適當(dāng)?shù)南♂專ㄓ孟♂屢海４伺浜玫娜旧何从猛昕纱娣庞?20℃避光。

a.對于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則優(yōu)良行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行PI染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的PI染色。

b. 對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。

c. 吸除，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

d.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

注意事項(xiàng)：

1．  為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2．  此染色液可一次性配完使用，保存于-20℃。但相對來說，50ml液體解凍速度不如1ml的解凍快，而且染料在高濃度時更穩(wěn)定。

3．  本產(chǎn)品配送的滴瓶一滴約為50ul。裝入染色液后請?zhí)兹牒谏饪诖?/p>

4．  染色時間可根據(jù)染色結(jié)果來適當(dāng)調(diào)整。