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主要用途
1. 土壤氧化應激研究:用于測定土壤中微生物或植物殘體來源的超氧化物歧化酶活性,評估土壤氧化應激水平,研究土壤污染、重金屬脅迫等環境因素對土壤酶活性的影響。
2. 土壤微生物活性評估:通過檢測土壤樣本中SOD活性,間接評估土壤微生物群落的代謝活性和健康狀況,為土壤生態研究提供數據支持。
3. 植物根際研究:適用于植物根際土壤中SOD活性的測定,研究植物與土壤微生物間的相互作用,以及植物生長對土壤環境的影響。
4. 農業科學研究:用于評估土壤改良劑、有機肥料等對土壤酶活性的影響,研究土壤健康與作物生長的關系,為精準農業和土壤管理提供科學依據。
5. 環境監測:用于監測受污染土壤中SOD活性的變化,評估環境修復措施的效果,研究土壤生態恢復進程。
檢測原理
采用WST-1法檢測超氧化物歧化酶活性,其原理基于以下生化反應:
1. 超氧陰離子的產生:黃嘌呤(xanthine)在黃嘌呤氧化酶(XO)的催化作用下,與氧氣(O?)反應生成超氧陰離子(O??)、尿酸(uric acid)和(H?O?)。反應式如下:
2. XO + O? + xanthine → O?? + uric acid + H?O?
3. 顯色反應:產生的超氧陰離子(O??)可與WST-1反應,將其還原為橙黃色水溶性甲沉迷(formazan dye),該產物在450nm波長處有強吸光度。反應式如下:
4. O?? + WST-1 → WST-1 formazan(橙黃色)
5. SOD活性的測定:超氧化物歧化酶(SOD)能催化超氧陰離子(O??)歧化為氧氣(O?)和(H?O?),從而抑制WST-1的顯色反應。通過測定對照組(無SOD)與樣本組(含SOD)的吸光度差異,可計算出SOD的酶活性。
6. SOD + 2O?? → 3O? + 2H?O?
7. 定量分析:SOD活性通過抑制率百分比表示,計算公式為:
8. 抑制率(%) = [(空白對照管吸光度 - 樣本管吸光度)/空白對照管吸光度] × 100%
其中,空白對照管通常指不含樣本的反應體系,而對照管為不含SOD的反應體系。
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